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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
人膀胱平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
人膀胱平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：JRK蛋白抗體 志賀氏菌菌體蛋白抗體 Rab27a蛋白抗體 人臍帶血單核細(xì)胞 兔肌源性干細(xì)胞 T98G人腦部多形性成釉細(xì)胞瘤細(xì)胞 FHs 74 Int (人小腸上皮細(xì)胞)
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：574
更新時(shí)間：2025-04-09
產(chǎn)品特性Product characteristics
人膀胱平滑肌細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
膀胱組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7256 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人膀胱平滑肌分離自膀胱組織；膀胱是主要由平滑肌細(xì)胞組成的中空器官，膀胱平滑肌的舒張和收縮使得膀胱分別儲(chǔ)存和排出尿液。膀胱平滑肌細(xì)胞表型的調(diào)控和可誘導(dǎo)一氧化氮合酶的表達(dá)與多種病理狀況有關(guān)，包括膀胱功能障礙。研究表明，組織缺氧抑制膀胱平滑肌細(xì)胞的增殖，膀胱平滑肌細(xì)胞的分化依賴于膀胱上皮細(xì)胞釋放的因子。膀胱平滑肌細(xì)胞外基質(zhì)的分泌表型可通過細(xì)胞所經(jīng)歷的機(jī)械變形頻率而改變。平滑肌是許多疾病中的共同路徑，因此，了解在疾病發(fā)生及持續(xù)過程中平滑肌怎樣變化，這是治療方法取得進(jìn)展的重要一步。膀胱壁由三層組織組成，由內(nèi)而外為黏膜層、肌層和外膜。其中，肌層主要由平滑肌構(gòu)成。膀胱平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。體外培養(yǎng)膀胱平滑肌細(xì)胞不僅為組織工程膀胱、尿道提供種植細(xì)胞的必要手段，也是研究平滑肌瘤的基礎(chǔ)與前提。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人膀胱平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人膀胱平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
胃動(dòng)蛋白2 英文名稱： Human Gasokine 2 規(guī)格： 英文縮寫： GKN-2
內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素 英文名稱： Human Glucocoicoid Endogenous 規(guī)格： 英文縮寫： GC
葡萄糖激酶 英文名稱： Human Glucokinase 規(guī)格： 英文縮寫： GCK
葡萄糖60酸脫氫酶 英文名稱： Human Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase 規(guī)格： 英文縮寫： G6PD
小鼠蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA 試劑盒
Rat urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 大鼠型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒
Humanai-immunodeficiencyvirusaibody,HIVELISAKit 人抗人類免疫缺陷病毒抗體(HIV)試劑盒 進(jìn)口分裝
Humanasymmeicaldimethylarginine,ADMA試劑盒人不對(duì)稱二甲基精(ADMA)試劑盒
植物源性食品土豆(potato)試劑盒20次
Humahymicsomallymphopoietin,TSLPELISAKit人基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)試劑盒
細(xì)胞色素B抗體
FGF4單克隆抗體
EPCAM重組大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 Protein
Gentamicin/OVA 慶大偶聯(lián)雞卵白蛋白 2mgGentamicin/OVA 慶大偶聯(lián)雞卵白蛋白
SPEG重組人 SPEG / APEG-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
FGF19 Protein Human 重組人 FGF19 蛋白
ECM1 Protein Mouse 重組小鼠 ECM1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Gentamicin/OVA 慶大偶聯(lián)雞卵白蛋白 2mgGentamicin/OVA 慶大偶聯(lián)雞卵白蛋白
FGF19 Protein Human 重組人 FGF19 蛋白
EPCAM重組大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 Protein
ECM1 Protein Mouse 重組小鼠 ECM1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SPEG重組人 SPEG / APEG-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
人膀胱平滑肌細(xì)胞大鼠細(xì)胞色素P450家族成員1A1(CYP1A1)試劑盒 ，英文名： CYP1A1 ELISA Kit
Mouse epinephrine (EPI) ELISA Kit 小鼠(EPI)試劑盒
MouseCholecystokinin,CCKELISAKit 小鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHSP-70(HumanHeatShockProtein70)ELISAKit人熱休克蛋白70
細(xì)胞KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定性試劑盒20次
ELISAKitIL-2大鼠白介素2
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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