人胱天蛋白酶9(Casp-9)elisa試劑盒洗滌方法：

1. 自動洗板機(jī)：每孔加入洗滌液350μl，注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350μl，浸泡1-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體，在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫；試劑或樣品配制時，均需充分混勻，并盡量避免起泡。

1.加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。給酶標(biāo)板覆膜，37℃孵育2小時。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.棄去液體，甩干，每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制)，酶標(biāo)板加上覆膜，37℃溫育1小時。

3.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。

干4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時。

5.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長，但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時，即可終止)。

7.每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源，預(yù)熱儀器，設(shè)置好檢測程序。

9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。

過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)重組蛋白

過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)重組蛋白

含Ⅲ型纖連蛋白域蛋白5(FNDC5)重組蛋白

含RNA結(jié)合冷休克域蛋白E1(CSDE1)重組蛋白

含動力蛋白重鏈域蛋白1(DNHD1)重組蛋白

含卷曲螺旋域蛋白3(CCDC3)重組蛋白

含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)重組蛋白

核糖核酸酶A10(RNASE10)重組蛋白

核糖核酸酶A12(RNASE12)重組蛋白

核糖體蛋白L23A(RPL23A)重組蛋白

核糖體蛋白S6激酶β1(RPS6Kβ1)重組蛋白

核因子κB受體激活因子配基(RANκL)重組蛋白

黑色素瘤關(guān)聯(lián)硫酸軟骨素蛋白聚糖(MCSP)重組蛋白

紅細(xì)胞補(bǔ)體受體1(CR1)重組蛋白

紅細(xì)胞生成素(EPO)重組蛋白

紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)重組蛋白

花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重組蛋白

滑行蛋白α(TXLNα)重組蛋白